血清学的アッセイの動作機序
研究チームは、この研究成果を『METHODS』誌 の最新版に発表しました。彼らが開発した 5 プレックスアッセイは、「Tdap ワクチン接種動物において百日咳菌抗原、百日咳毒素、線維状赤血球凝集素 (FHA)、ペルタクチン (PRN)、破傷風 (T)、ならびにジフテリア (D) トキソイドに対する血清 (IgG) 抗体の濃度を同時測定します。」 と著者らは記しています。
混合ワクチンは多くの理由で重要ですが、前臨床評価にはまだ多くの課題があります。開発の後期にあってさえも、これらの多価ワクチンのモニタリングには困難を極めます。そのため、世界保健機関と欧州薬局方のいずれもが「製造ロット間一貫性のモニタリング」にマウスを用いた非致死性免疫原性検査を推奨していると、科学者らは記しています。従来の試験では、「ワクチンを段階的に希釈してマウスを免疫し、百日咳ワクチンの各成分に対する血清 IgG 抗体反応を ELISA 法で測定していました。」
マルチプレックス解析によるコストと時間の削減
このマルチプレックス化プロジェクトは、費用がかかり、実行に長い時間を要し、大量の血清を要する ELISA の必要性をなくすために開始されました。このチームは、この分野で成功を収めてきた xMAP® テクノロジーを選択しました。「ワクチン誘発結合抗体の評価におけるこのプラットフォームの精度とハイスループットの利点が、いくつかの研究ですでに報告されています。」と著者らは報告しています。
開発後、様々な希釈率で免疫した動物から採取した血清サンプルを用いてマルチプレックスアッセイを評価しました。「このアッセイは、5 つの抗原すべてに対する IgG 反応の用量依存的傾向を予測することができました。これは、臨床的有効性が証明された基準ワクチンバッチに対する各ワクチンの効力と品質を定義するために重要です。」と科学者らは指摘しています。検証は国際的な規制ガイドラインに従って実施されました。
「ここで説明するアッセイは、特異性、選択性、再現性、正確性のすべての要件を満たしているため、マウス血清サンプル中の DTaP3 抗体の検出において、従来の ELISA 法に代わる有効な方法です。」と著者は結論付けています。